胚胎細(xì)胞融合儀器CF-150B

細(xì)
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歐盟生物實驗室設(shè)備與維護(hù)集團(tuán)（Biologica lLaboratory Equipment, Maintenance and Service Ltd.簡稱：BLS）, BLS公司是歐洲一家專業(yè)生產(chǎn)電融合設(shè)備的廠家，尤其在胚胎干細(xì)胞的電融合上面更具有特殊的技術(shù)。BLS產(chǎn)品的用戶遍布全球，用我們的設(shè)備發(fā)表的文章每年多達(dá)數(shù)百篇。在CELL，NATURE以及NUCLEARACID等專業(yè)雜志上經(jīng)常可以見到BLS矯健的身影。其提供的大量文獻(xiàn)與PROTOCOL給用戶的科研工作帶來極大的方便。

核移植是將細(xì)胞核從供體轉(zhuǎn)入受體的過程。細(xì)胞核指導(dǎo)胚胎的發(fā)育，導(dǎo)致新生體出生。在這個過程中，電融合用于將供體細(xì)胞與受體卵細(xì)胞融合，并進(jìn)一步激活細(xì)胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）將核移植技術(shù)擴(kuò)展至靈長類動物模型，克隆出恒猴。技術(shù)的進(jìn)步使研究人員能夠從分裂球進(jìn)展至更高分化的胚胎細(xì)胞以及靜止的胚兒細(xì)胞，作為核的供應(yīng)來源。胚胎產(chǎn)生的細(xì)胞在體外培養(yǎng)6-13代，然后在轉(zhuǎn)入前使用血清饑餓的方法使細(xì)胞靜止。

如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是在1998年報告使用非老化胚成纖維細(xì)胞作為核的供體進(jìn)行核移植而產(chǎn)生綿羊克隆轉(zhuǎn)基因牛的人。IanWilmut在1996年震驚了整個世界，他從成年乳腺的細(xì)胞產(chǎn)生出頭個動物克隆——多利。使用分化的成年細(xì)胞進(jìn)行克隆的能力打開了核移植廣泛運用的大門即基因的令人激動的模式。成功事例PPLTherapeutics公司從成年體細(xì)胞克隆出豬。對于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合樣品池及微型載玻片。

細(xì)胞融合儀
CF-150B胚胎細(xì)胞融合儀器和相關(guān)電極槽(GSS-250)專為哺乳動物胚胎分裂球電融合而設(shè)計，可在電解液或非電解液中運用。一個適當(dāng)導(dǎo)向的短電脈沖施加在早期胚胎可以溶解細(xì)胞膜，從而完成細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核融合。此儀器的主要應(yīng)用是產(chǎn)生小鼠四倍體胚胎產(chǎn)生和體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移克隆。標(biāo)準(zhǔn)的雙細(xì)胞分裂期胚胎能夠迅速地融入單個細(xì)胞（單細(xì)胞分裂期四倍體胚胎）。這種四倍體胚胎可用于與遺傳控制小鼠胚胎干細(xì)胞（ES）聚合，從而產(chǎn)生完全的ES衍生細(xì)胞胎兒(Nagyetal.,1990;NagyandRossant;1993)。

隨著ES細(xì)胞遺傳控制技術(shù)的發(fā)展，ES衍生細(xì)胞胚胎有了更廣闊的應(yīng)用空間：

1、應(yīng)用于測試新衍生的或遺傳控制的胚胎干細(xì)胞的發(fā)育潛能(Nagy et al., 1993).
2、完全ES衍生細(xì)胞胎兒為不同功能或遺傳研究提供豐富的組織和器官前身資源(Forrester et al. 1991).
3、*近，gene-trap戰(zhàn)略用于完全衍生ES胚胎聚合，此胚胎由ES四倍體細(xì)胞胚胎產(chǎn)生，從而獲取基因表達(dá)模式的直接信息CF-150B

細(xì)胞融合儀和專業(yè)設(shè)計的高精度電極槽一起使用。槽有三種不同的縫間隙，250μm,500μm和1000μm，型號名分別為GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在做雙細(xì)胞期分裂球融合時，任何一種槽均可使用。如果用于克隆目的，我們推薦GSS-250。電極材料是高品質(zhì)不銹鋼的，并將其安置在一種厚玻璃中。所有這些材料無毒。CF-150B細(xì)胞融合儀器和專業(yè)設(shè)計的電極夾GSH-1一起使用．此“快速夾”設(shè)計使得電極牢固夾在組織培養(yǎng)板（或其蓋上）。在融合過程中**不會有偶然的滑動，并且給電極線提供了長久的良好接觸。電極夾可用于三種里任何一種電極GSS-250,GSS-500orGSS-1000。

CF-150B細(xì)胞融合儀器和新型設(shè)計的聚合針DN-10一起使用．在組織培養(yǎng)板底部形成一個小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、ES細(xì)胞塊以及移植早期的鼠胚胎。和附件球一起使用，這些針頭更符合人體動力學(xué)，在使用中減少手指和手的壓力。

CF-150B細(xì)胞融合儀器和聚合針頭DN-09一起使用．聚合針DN-09是*早期設(shè)計的聚合針頭，在組織培養(yǎng)板底部形成一個小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、干細(xì)胞以及移植早期的鼠胚胎。

如果所有參數(shù)都選擇完善(完全按照BLS的protocol)，融合率將高于90%，胚胎在融合過程中死亡率低于10%，并且24小時內(nèi)至少80%成功融合的胚胎將成長為健康的四細(xì)胞期胚胎。