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動物細胞融合技術的發展簡史

日期:2025-06-15 04:09
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摘要:

19世紀30年代,科學家們相繼在肺結核、天花、水痘、麻疹等**患者的病理組織中觀察到多核細胞。19世紀70年代,科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象,但是由于受當時科學技術發展水平的限制,人們對這一現象并沒有給予足夠的重視。1958年,日本科學家崗田用滅活的仙臺病毒誘導人的腹水癌細胞融合成功。后來科學家們又成功地誘導了不同種動物的體細胞融合,并且能將雜種細胞培養成活。隨著細胞融合技術的不斷改進,現在這項技術已經廣泛應用于細胞學、遺傳學、**學、病毒學等多種學科的研究工作中。 

通過培養和誘導,兩個或多個細胞合并成一個雙核或多核細胞的過程稱為細胞融合(cell fusion)或細胞雜交(cell hybridization)。 

基因型相同的細胞融合成的雜交細胞稱為同核體(homokaryon);來自不同基因型的雜交細胞則稱為異核體(heterokaryon)。 

同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并,稱自發融合;異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合,稱誘發融合。 

誘導細胞融合的方法有三種:生物方法(病毒)、化學方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(電激和激光)。某些病毒如:仙臺病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介導病毒同宿主細胞融合,也可介導細胞與細胞的融合,因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導細胞融合?;瘜W和物理方法可造成膜脂分子排列的改變,去掉作用因素之后,質膜恢復原有的有序結構,在恢復過程中便可誘導相接觸的細胞發生融合。 

細胞融合不僅可用于基礎研究,而且還有重要的應用價值,在植物育種方面已經成功的有蘿卜+甘藍、粉藍**+郎氏**、番茄+馬鈴薯等等。
 
1957年,日本學者岡田善雄在培養動物細胞時加入失去活性的仙臺病毒,發現能使兩個動物細胞融合,產生具有兩個核的細胞。研究表明,很多不同種的動物細胞都能進行融合,形成雜種細胞。如人-鼠、人-兔、人-雞、人-蛙、鼠-雞、鼠-兔、鼠-猴等等。細胞融合的具體步驟包括: 

(1)細胞準備。分貼壁和懸浮細胞兩種。前者可直接將兩親本細胞混合培養,后者需制成一定濃度的細胞懸浮液。 

(2)細胞融合,加促融因子于將行融合的細胞之中,誘導融合。 

(3)雜種細胞選擇。利用選擇性培養基等,使親本細胞死亡,而讓雜種細胞存活。 

(4)雜種細胞克隆。對選出的雜種細胞進行克?。ㄟx擇與純化),經過培養,就能獲得所需要的無

          性繁殖系。 

植物細胞融合較動物細胞難些。

首先,植物細胞外面有細胞壁,因此需要先用纖維素酶去壁,形成原生質體后,才能進行細胞融合。
其次,植物細胞融合后形成的雜種細胞,經過培養有可能分化發育成植株,而動物細胞的雜種細胞則缺乏此種能力。

植物體細胞融合的過程大致包括:細胞分離,原生質體制備,原生質體融合,雜種細胞篩選及其培養,然后再通過愈傷組織誘導分化出根、莖、葉,*后長成完整的體細胞雜種植株。植物細胞融合技術不僅打破了常規有性雜交育種的親和性障礙,而且為實現超遠緣雜交提供了可能,有重大的應用價值。


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